一、WB（蛋白质免疫印迹）

WB是一种基于抗体技术的蛋白质分析方法。

【实验原理】通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）将混合蛋白质样品分离后，利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质（例如PVDF膜）上，再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与相对应的第一抗体特异性结合，之后再与酶或同位素标记的第二抗体相结合，然后通过底物显色或放射自显影来检测特异性目的基因表达的蛋白成分。

【抗体选择】WB的蛋白经过加热变性之后都会变成线性的结构。因此一般采用人工合成多肽为抗原制备的抗体。

二、FC（流式细胞术）

FC是一种高效的细胞分析技术，它可以对单个细胞进行快速、准确的分析和分类。

【实验原理】活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第·抗体结合，根据所测定的荧光强度和阳性百分率，即可得知相应抗原的密度和分布。

【抗体选择】流式细胞分为两种，一种是活细胞的流式一般采用天然蛋白为抗原制备的抗体、重组蛋白为抗原制备的抗体；另一种是固定细胞的流式，一般采用人工合成多肽为抗原制备的抗体、重组蛋白为抗原制备的抗体。

三、IP（免疫沉淀）/CHIP（染色质免疫共沉淀）

IP/CHIP：是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的，用于研究蛋白质相互作用或蛋白质与遗传物质之间相互作用的经典方法。根据不同种类的检测目标，可以将IP技术分为CHIP、RIP、CO-IP。

【实验原理】根据抗原和抗体的特异性结合，利用抗体将靶标蛋白（即抗原）分离出来，目的是为了检测某一种蛋白的表达情况。

【抗体选择】IP/CHIP主要是用抗体去结合生理状态下的蛋白质，一般采用纯化的天然蛋白制作的抗体，也可以用纯化的重组蛋白制作的抗体，

四、IF（免疫荧光）

IF是一种用于检测以及识别细胞和组织中蛋白质和其他分子的亚细胞分布和迁移的强大检测技术。

【实验原理】根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位，以及利用定量技术测定含量。

五、IHC（免疫组化）

IHC是一种基于抗体的技术，利用抗体与抗原之间的关系，以显现蛋白表达原位。

【实验原理】利用酶、荧光素、生物素、重金属离子等作为示踪剂，通过免疫亲和（抗原抗体特异性结合），在组织切片或细胞薄片上原位显示追踪生物体内大分子物质动态变化规律的实用性染色技术。

文章出自：验外实包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/